05/2015
1、支原体鉴定
支原体是一种大小仅为0.2~0.3 um(图1A,B),无细胞壁,可透过一般过滤膜(0.22-0.45 um)的原核生物,在细胞培养过程中,支原体感染发生率达到63%,因而细胞培养过程中被支原体污染是一个世界性的难题。当细胞(特别是传代细胞)被支原体污染后,细胞内的DNA、RNA及蛋白表达发生改变,而细胞的生长率一般并未发生显著的影响,因而细胞被支原体污染一般难以察觉。
纳米生化平台细胞生物学实验室采取两种方法进行支原体鉴定,一种方法为灵敏度较高的PCR方法(图1D);另外一种为Hoechst33258染料法,支原体阳性细胞会在细胞核周围显示出有沙砾样物质(图1C)。
2、细胞系身份鉴定
细胞系在不断传代中容易发生突变、缺失等遗传改变,还可能受到其他生长速度较快的细胞系的污染,这些都会导致细胞系丧失本身特性,使我们的实验失败。目前已经有多家细胞保存机构发现细胞系间交叉污染情况的发生,在我们平台的日常检测中也发现了很多类似情况。因此定期检查细胞系身份对科研结果的正确性十分必要。短小串联重复(Short tandem repeats, STR)技术目前是鉴定细胞系身份的金标准,本平台采用含16个位点的STR鉴定试剂盒对细胞真实性进行鉴定。
图1.细胞支原体污染 (A)支原体生长在细胞表面的电镜照片(B)大量支原体密布在细胞表面上。(C)本平台检测的受到支原体污染的CHO-K1 细胞。(D)PCR方法检测细胞受到支原体污染的情况。
图2.MCF-7细胞的STR鉴定图谱,经过与ATCC种质资源保存中心的结果进行对比后发现有一个位点发生了改变。
3、原代细胞分离及代培养服务
a.本平台目前提供部分原代细胞的分离鉴定工作,现主要为人源间充质干细胞(脐带来源、骨髓来源)(图3A,B)及鼠源间充质干细胞的培养工作、鼠神经元细胞的分离培养。
b. 载体构建及细胞转染服务(图3C)
4、药物毒性的细胞水平相关检测服务
形态学水平观察、细胞周期变化、细胞凋亡情况分析等。
图3、原代分离的细胞及化学转染的细胞。(A)原代分离的人间充质干细胞(B)原代分离的鼠神经元细胞(C)A549细胞通过化学转染的方法转入带EGFP的载体。
03/2015
共同见证完美Western Blot的艺术——AWB新品体验沙龙邀请函 尊敬的各位老师、同学: Western Blot是蛋白质研究的最基本手段之一,据不完全统计,WB实验在全球37,000多个实验室广泛应用,发表的学术文章中约60%含有WB实验数据。 过去,我们使用胶片曝光,可能会遇到这些问题:暗室黑暗?不知道曝光多久最好? 不知道显影多久合适?定量结果不准确?结果无法重现? 现在,我们使用凝胶成像,可能还会遇到新的问题?又漏胶了?膜,剪还是不剪? 如果不剪膜,定量不准确? 结果无法重现? GE公司于2014年9月24日全球同步推出AWB一体化蛋白免疫印迹系统,基于凝胶的经典WB,仅需4小时完成实验,提供更便捷的WB实验工具和更完整准确的实验数据。在此,我们诚邀您参加“AWB新品体验沙龙”,共同见证完美Western Blot的艺术! 沙龙时间: 2015年4月1日 下午14:00 沙龙地点:苏州工业园区若水路398号 生化平台 D1204 室 如果您有有样品做WB实验,可以提前跟举办方(刘金英13861316837,18621026937,jinying.liu@dynamaxbiotech.com)联系,以便安排demo实验的时间。 日程安排: 时间 内容 14:00-15:00 总蛋白标记法western blot及AWB介绍 15:00-16:00 AWB现场操作体验 主办单位: 通用电气(中国)医疗集团生命科学部
02/2015
Molecular Devices单抗及蛋白药物高通量筛选平台讲座
2015年2月3日下午,在纳米生化平台D1204会议室召开了关于“单抗及蛋白药物高通量筛选” 的讲座。纳米生化平台邀请到Molecular Device公司高通量药物发现部门主管人员,深入浅出的为大家介绍了该公司在单抗和蛋白药物高通量筛选方面的主要技术和仪器。不仅各个相关课题组的同学踊跃参加,而且纳米所周边的主要抗体公司:信达生物制药(苏州)有限公司、苏州康宁杰瑞生物科技有限公司、天演药业(苏州)有限公司等也有许多相关人员参与。与会人员涉及细胞克隆、细胞株筛选、分子生物学、单克隆筛选、噬菌体展示技术等相关专业,均对此次讲座给予了高度评价。
Molecular Device公司主讲人员,着重介绍了ClonePix 2 和QPix 400仪器,前者用于高通量细胞克隆筛选、自动化挑取及转移;后者则更注重于高通量微生物克隆筛选、自动化挑取及转移。利用此类仪器,可获得单个细胞或者微生物的克隆,通过多种检测方法,利用自身强大的软件,客观的成像分析,使用户可以准确的筛选到最优表达水平的克隆。将大量的人力、物力从繁重盲目的筛选中解放出来。大大缩短了单抗和蛋白药物的研发周期。
01/2015
我们可以为您提供以下细胞株:
细胞株英文名称 | 细胞株中文名称 | 价格(元) |
293(HEK-293) | 人胚肾细胞 | 450 |
293T | 人胚肾细胞 | 450 |
4T1 | 小鼠乳腺癌细胞 | 600 |
786-0 | 人肾透明细胞腺癌细胞 | 800 |
95-C | 低转移肺癌细胞 | 800 |
95-D | 高转移肺癌细胞 | 800 |
A549 | 人非小细胞肺癌细胞 | 700 |
A549-EGFP | 人非小细胞肺癌细胞-绿色荧光蛋白 | 1500 |
A735 | 人恶性黑色素瘤细胞 | 800 |
AAV-293 | 人胚肾细胞 | 800 |
BHK21 | 叙利亚仓鼠肾成纤维细胞系 | 800 |
BM-MSC | 鼠间充质干细胞 | 1000 |
C2C12 | 小鼠成肌细胞 | 600 |
Caski | 人宫颈癌细胞 | 800 |
CCRF-CEM | 人急性淋巴细胞白血病T淋巴细胞 | 800 |
CHO-K1 | 仓鼠卵巢细胞亚株 | 800 |
CT26-WT | 鼠结肠癌细胞 | 1000 |
F81 | 猫肾细胞 | 450 |
H460 | 大细胞肺癌细胞株 | 800 |
HBL-100 | 人乳腺细胞系 | 600 |
HCT116 | 人结肠癌细胞 | 700 |
Hela | 人宫颈癌细胞 | 600 |
Hep-2 | 人喉癌细胞 | 800 |
Hep-G2 | 人肝癌细胞 | 800 |
HT-29 | 人结肠癌细胞 | 1000 |
Hu-MSC | 人间充质干细胞 | 1200 |
KATO-III | 人胃癌细胞 | 800 |
KB | 人口腔表皮样癌细胞 | 450 |
L929 | 鼠成纤维细胞 | 600 |
MCF-7 | 人乳腺癌细胞 | 700 |
MDA-MB-231 | 人乳腺癌细胞 | 600 |
MDA-MB-435 | 人乳腺癌细胞 | 600 |
PC-3 | 人前列腺癌细胞 | 800 |
Raji | 人Burkitt's淋巴瘤细胞 | 800 |
RAW264.7 | 小鼠单核巨噬细胞白血病细胞 | 1000 |
SK-0V-3 | 卵巢癌细胞 | 500 |
SK-BR-3 | 人乳腺癌细胞 | 800 |
T24 | 人膀胱移行细胞癌细胞 | 400 |
U87-MG | 人脑星形胶质母细胞瘤 | 800 |
VERO | 非洲绿猴肾细胞 | 450 |
细胞株购买咨询: 原丽华 0512-62872644 lhyuan2011@sinano.ac.cn
01/2015
我们可以为您提供以下细胞类服务:
技术服务名称 | 实验周期 | 数量 | 服务价格(元) |
细胞代培养 | 1-2周 | 1 | 600 |
细胞转染实验 | 1-2周 | 1 | 500 |
细胞增殖及活性检测 | 1-2周 | 1 | 100 |
细胞凋亡检测 | 1-2周 | 1 | 100 |
细胞周期检测 | 1-2周 | 1 | 100 |
克隆形成实验 | 1-2周 | 1 | 200 |
transwell 细胞迁移实验 | 1-2周 | 1 | 200 |
transwell细胞侵袭实验 | 1-2周 | 1 | 500 |
MTT比色实验 | 1-2周 | 1 | 800 |
细胞支原体检测 | 1-2周 | 1 | 800 |
细胞真实性鉴定 | 1-2周 | 1 | 1200 |
多因子检测(流式,客户提供试剂) | 1-2周 | 1kit | 200 |
ELISA客户(提供试剂) | 1-2周 | 1kit | 700/板 |
植物细胞倍体、C值分析 | 1周 | 1 | 50 |
植物细胞原生质体分选(含样本制备) | 1-2周 | 1样本/1次分选 | 2000 |
细胞类服务联系人:原丽华 0512-62872644 lhyuan2011@sinano.ac.cn