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细胞类对外服务

2015/05/12 系统管理员

1、支原体鉴定
支原体是一种大小仅为0.2~0.3 um(图1AB),无细胞壁,可透过一般过滤膜(0.22-0.45 um)的原核生物,在细胞培养过程中,支原体感染发生率达到63%,因而细胞培养过程中被支原体污染是一个世界性的难题。当细胞(特别是传代细胞)被支原体污染后,细胞内的DNARNA及蛋白表达发生改变,而细胞的生长率一般并未发生显著的影响,因而细胞被支原体污染一般难以察觉。
纳米生化平台细胞生物学实验室采取两种方法进行支原体鉴定,一种方法为灵敏度较高的PCR方法(图1D);另外一种为Hoechst33258染料法,支原体阳性细胞会在细胞核周围显示出有沙砾样物质(图1C)。
2、细胞系身份鉴定
   细胞系在不断传代中容易发生突变、缺失等遗传改变,还可能受到其他生长速度较快的细胞系的污染,这些都会导致细胞系丧失本身特性,使我们的实验失败。目前已经有多家细胞保存机构发现细胞系间交叉污染情况的发生,在我们平台的日常检测中也发现了很多类似情况。因此定期检查细胞系身份对科研结果的正确性十分必要。短小串联重复(Short tandem repeats, STR)技术目前是鉴定细胞系身份的金标准,本平台采用含16个位点的STR鉴定试剂盒对细胞真实性进行鉴定。
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1.细胞支原体污染 (A)支原体生长在细胞表面的电镜照片(B)大量支原体密布在细胞表面上。(C)本平台检测的受到支原体污染的CHO-K1 细胞。(DPCR方法检测细胞受到支原体污染的情况。








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2.MCF-7细胞的STR鉴定图谱,经过与ATCC种质资源保存中心的结果进行对比后发现有一个位点发生了改变。

3、原代细胞分离及代培养服务

   a.本平台目前提供部分原代细胞的分离鉴定工作,现主要为人源间充质干细胞(脐带来源、骨髓来源)(图3AB)及鼠源间充质干细胞的培养工作、鼠神经元细胞的分离培养。

   b. 载体构建及细胞转染服务(图3C

4、药物毒性的细胞水平相关检测服务

    形态学水平观察、细胞周期变化、细胞凋亡情况分析等。

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3、原代分离的细胞及化学转染的细胞。(A)原代分离的人间充质干细胞(B)原代分离的鼠神经元细胞(CA549细胞通过化学转染的方法转入带EGFP的载体。