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现代生命科学已经形成了从分子基因到蛋白结构功能、从细胞活动到生物体行为的一套比较完整的从微观到宏观的研究体系。目前的细胞成像研究已经不仅仅局限于少量的固定样品的显微结构观察和拍摄,在细胞动力学、蛋白质运输与互作、信号传导等功能研究领域,以及大量生物样本间的科学的影像定量统计学数据的分析整理都对实验方法提出了更高的要求。这些生物学动态过程和影像定量统计学的研究,都离不开先进的细胞成像技术及其进步,由此高内涵成像分析系统便应运而生。
高内涵细胞成像与分析系统(HCA, High-content analysis)是指在保持细胞结构和功能完整性的前提下,通过自动化细胞成像分析的方法,对多孔板的每一个孔的目的细胞进行单细胞水平的状态、变化等多参数的、总体趋势的分析。在单一实验中同步获取细胞内靶蛋白的空间/时间分布、表达强度、细胞与细胞器的形态和复杂表型、多种细胞亚群的分类等方面的高可靠性的具有统计学意义的分析结果,同时去除其它细胞与人为误差的干扰。 HCS的结果由图像分析所得,兼顾了直观与批量统计定量的优点,同时输出单细胞和群体细胞的结果。
本设备支持常规的 6-1536 微孔板板及芯片成像检测,提供客观批量的高质量的图像同时更可基于影像信息进行多参数的复杂数据统计分析,超高的成像通量保障了研究人员可以从动态上捕捉瞬时发生的细胞事件,统计中更保证数据分析有足够的细胞图像作为统计学分析样品。多参数的强大数据分析可在群体细胞水平和单细胞水平,针对不同细胞模型采用荧光强度区域分析,细胞形态学分析,细胞内部纹理(细胞骨架,细胞器线粒体分布等),明场细胞照片的无标记分析等多种不同分析手段,综合的对细胞的状态、变化、总体趋势进行分析,得到具有高内涵、高可靠性的分析结果,立体的对细胞各个方面不同侧面进行阐述。
Perkin Elmer 公司推出的 Operetta CLS 高内涵分析系统集高速、高灵敏度的数据采集和强大、准确的数据分析能力于一身,秉承 Operetta 系统稳定可靠的性能,满足全自动细胞生物学图像采集分析的各项要求。
借助全新的硬件设计, Operetta CLS 系统可以高质量的满足高内涵成像分析的各项需求:高清晰的水浸物镜较之空气镜大幅度提升了通光量,从而获得超越预期的图像质量;高能固态光源涵盖多达8个激发波段,使染料选择更加丰富灵活,并且高能量光源最大程度保证了图像的高信噪比;还可以根据实验的需要,在共聚焦或宽场成像模式间自由切换;而最新的高灵敏度 sCMOS 相机提供了超大的成像视野和超高的图像分辨率。
本设备典型性能指标和硬件特色如下:
对 96 孔板进行单通道全孔成像仅需 11 分钟(使用5×物镜)。
对 96 孔板进行双通道全孔覆盖成像仅需 35 分钟(使用10×物镜)。
支持培养条件下的活细胞动态长时拍摄、并自动生成视频文件。
物镜镜头全部来自蔡司公司。
采用激光硬件自动对焦 (laser autofocus),大大节省对焦时间。
配备转盘式共聚焦模块,可实现免洗荧光检测。
磁悬浮载物台精度达到 100 nm.
sCMOS 相机像素尺寸为 6.5 × 6.5 μm.
Operetta CLS 系统搭载的 Harmony 软件,集图像采集、数据分析为一体,易学、易用,可以帮助生物学家轻松编辑自己的分析方案,摆脱各种复杂繁琐的程序命令带来的困扰。
软件预设39种经过各大药企验证的可靠、易用的数据分析模块。
软件支持多视野自动拼接和3D层扫重构。
软件整合了大量智能图像识别技术,提供了 tune parameter 自动化算法推荐模块,可根据不同实验图像质量推荐算法;或某参数的最佳阈值,大大节约了研究者建立和测试算法的时间。