NanoDrop 2000使用高能量氙灯（pulsed xenon flash lamp）可提供190~840nm的全光谱检测，且不需要暖机，开机后立即使用。搭配高感度CCD array检测器，检测吸收值可高达300Abs（dsDNA浓度2~15000ng/ul），大部分纯化后的核酸几乎都不需要稀释即可检测。

待测样品的均质性是NanoDrop 2000的最高要求，一般核酸、蛋白质样品能在检测前以vortex mixer震匀为最佳，若无vortex mixer也应以pipette吸放数次混匀。若担心genomic DNA可能因前述动作而断裂，则改以55ﾟC加热约一分钟，使样品在侦测前呈现均匀状态，以确保 2ul 具有代表性。

 检测时选择不同检测模式，可以得到最快速的结果：
● Nucleic Acid – 吸收光谱、230nm, 260nm, 280nm吸收值（换算成10mm光径吸收值）、260/280 ratio、260/230 ratio及核酸浓度。

● UV-Vis – 190~840nm间所有波长的吸收值及光谱（以1mm光径吸收值呈现）。

● A280蛋白质定量法 – 280nm吸收值（换算成10mm光径吸收值）、260/280 ratio及蛋白质浓度。仅适用于纯化后的蛋白质，须具有已知的质量消光系数（mass extinction coefficient）方可计算。

● BCA、Bradford及Lowry – 依不同呈色剂提供不同波长吸收值结果，自动画出标准曲线并计算R square，待测蛋白质浓度。

 

培训内容：

1.    软件设定：

打开电脑电源，双击图标打开程序，进入软件主界面，选择应用程序，如检测核酸为，检测蛋白为，（默认分组 classic，不用管），接着会连续出现以下几个提示框，选“是”

点 OK（确保检测臂是放下的），稍等片刻即进入测量界面。

左边的界面只需勾选 Add to report，其它选项一般情况下不用管，右边 Sample ID 里给样品命名，Type 里选择样品类型，接下来就可以上样测量了，默认基座模式 (pedestal)。

基座模式(pedestal)

2.    清洁光纤表面：做 BLANK 前加 2 µL 蒸馏水到下光纤表面，放下检测臂，然后抬起来用滤纸将上下检测臂的水吸干，如此重复3次，可保证 BLANK 准确

3.    做空白对照：抬起检测臂，用移液枪吸取2 µL BLANK 液体（溶解检测物质的缓冲液）加到下光纤表面，放下检测臂，点击 BLANK 空白对照

4.    加样测量：抬起检测臂，将上下光纤表面的液体用滤纸吸干，吸取适量样品（核酸 1.5-2  µL，蛋白 2-2.5  µL，请先将样品混匀）加到下光纤表面，放下检测臂，两个光纤之间会形成液柱，点击 Measure 测量，软件右边就会出现测量结果

5.    测量完成后，点击左侧下方的Report，并选中需要保存的数据，点击左侧上方的，数据将已Excel形式保存在指定路径。

注意：测量完成后用滤纸擦干净上下光纤的样品，并用蒸馏水3次清洁上下光纤端面，检测臂放下，盖上防尘罩，关闭电脑，完成使用登记。