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提高仪器设备的使用率,减少重复购置,节约资金的需求

2100 微电泳生物分析仪

  • Agilent 2100
  • Agilent
  • MAB13009
  • 分子生化
  • 委托操作
  • 在线
  • 沈叶

    13962524331

    yshen2010@sinano.ac.cn

  • D1206
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仪器介绍

Agilent 2100 生物分析仪已经取代了繁琐的凝胶电泳技术成为RNA 样品质量控制(QC)的行业标准。同时在DNA 片段分析和蛋白样品SDS-PAGE 分析中迅速取代凝胶电泳技术。Agilent2100 生物分析仪的独特优点在于它既可用于电泳分离,同时对每一个片段的大小进行精确测定和浓度定量,又能进行细胞荧光参数的流式分析。这种多功能性使Agilent 2100 生物分析仪成为分子生物学家和生物化学家们不可或缺的工具。。Agilent 2100 生物分析仪于1999 年面世,是将微流控技术用于生物样品分析的最早的商用仪器,截止2010年初,全球已有超过7000 台的安装数量以及超过10,000篇的文献引用。

应用:

RNA 样品质量控制:使用RNA 完整值(RIN) 来确定RNA 的质量-RIN 值已经成为RNA 研究领域内质量评估的黄金标准,用于总RNA,mRNA 和小RNA 的数据分析

  • DNA 分子量确定和定量分析:对DNA 分子进行高分辨率的分离和定量
  •  
  • 蛋白质分析:代替SDS-PAGE 电泳对蛋白质进行分析,快速可靠的分析蛋白质浓度和纯度,灵敏度可与银染相媲美

性能指标

捷伦Agilent 2100生物分析仪 成功的基于微流控的商业化平台,提供用于DNA、RNA、蛋白质和细胞分析的解决方案,30 分钟内即可给出结果,提供自动化的、高品质的数字化数据。
特点:
# 比凝胶电泳更快速(30分钟内给出多达 12 个样品的定性定量数字化数据)。
# 重现性好、完整的数字化数据。
# 便于使用和共享。
# 对每个样品中的每个独立片断进行定量,给出纯度结果。
# 法规遵循服务满足在规定环境下工作的要求(如:QA/QC实验室)

性能指标

核酸分析时间:30分钟完成12个样本的分析(安捷伦所有DNA Kit 和RNA 6000 Nano Kit)

核酸分析形式:同步完成核酸样品的定性及定量分析

核酸样品消耗:DNA 1ul,RNA 1ul

核酸分析结果显示形式:可以显示为电泳图片形式以及HPLC格式

核酸分析灵敏度:1ng/ul(DNA),10ng/ul(总RNA)

RNA完整数:世界通行的RNA质控标准,专利保护;实现样品自由比对

核酸分析线性范围:纳克试剂盒 5~500ng/ul

small RNA分析:可对small RNA( 6-150nt)分子进行定性,定量分析(Agilent small RNA Kit)

蛋白分析时间:30分钟完成10个样本的分析

蛋白分析形式:允许对每个样本进行定性及定量同步分析

全自动蛋白分析:全自动蛋白分析功能,无需后续染色和脱色

蛋白样品消耗:4ul

蛋白分析灵敏度:1pg/ul(High Sensitivity Protein 250 Kit)

蛋白分析结果显示形式:可以显示为电泳图样形式以及峰值曲线格式性能指标

核酸分析时间:30分钟完成12个样本的分析(安捷伦所有DNA Kit 和RNA 6000 Nano Kit)

核酸分析形式:同步完成核酸样品的定性及定量分析

核酸样品消耗:DNA 1ul,RNA 1ul

核酸分析结果显示形式:可以显示为电泳图片形式以及HPLC格式

核酸分析灵敏度:1ng/ul(DNA),10ng/ul(总RNA)

RNA完整数:世界通行的RNA质控标准,专利保护;实现样品自由比对

核酸分析线性范围:纳克试剂盒 5~500ng/ul

small RNA分析:可对small RNA( 6-150nt)分子进行定性,定量分析(Agilent small RNA Kit)

蛋白分析时间:30分钟完成10个样本的分析

蛋白分析形式:允许对每个样本进行定性及定量同步分析

全自动蛋白分析:全自动蛋白分析功能,无需后续染色和脱色

蛋白样品消耗:4ul

蛋白分析灵敏度:1pg/ul(High Sensitivity Protein 250 Kit)

蛋白分析结果显示形式:可以显示为电泳图样形式以及峰值曲线格式

仪器配置

1. 芯片注胶平台
2. 芯片旋涡振荡器
3. Agilent 2100 专家软件,可进行仪器控制和数据分析(可扩展,以完全支持法规认证要求)
4. 仪器系统及应用的服务与支持

操作规范

1. 启动电脑,登陆刷卡系统。

2. 开生物分析仪电源(位于后侧底部),等待正面右上方状态灯显示绿色。

3. 双击电脑桌面上“2100 Expert”图标,进入Instrument 主界面,确认COM Port 选择正确(COM选择1),左侧仪器示意图清晰显示 (表示通讯正常) 。

4. 按照试剂盒操作说明准备好注胶平台(注射器安装是否足够紧固以及注胶平台密封性是否完好,对于实验成功至关重要!):

5. 按照试剂盒说明将2100 生物分析仪芯片槽的类型选择推杆推到正确位置(1 - 电泳,2 – 细胞)。

6. 按照试剂盒说明将芯片混匀仪转速设到正确位置(一般为2400rpm)。

7. 取出试剂盒,平衡到室温约30 分钟,注意避光。准备凝胶和染料的混合物,染料用完立即放回试剂盒避光。(请参照相应试剂盒说明,注意离心过滤和混合的先后顺序以及离心转速的不同)

8. 取出9ul(核酸)或12ul(蛋白)凝胶染料混合物,加入电泳芯片的注胶孔(注意不要接触芯片底部,往芯片孔中加液时伸入底部不要靠壁!)

9. 将芯片放入注胶平台,拉动注射器推杆至1ml 刻度并扣紧上盖,压下推杆至固定架卡扣,计时(时间参考试剂盒说明),到时间松开固定架卡扣,等待注射器推杆停止运动后将其缓慢拉回至1ml 刻度,松开注胶平台上盖。

10. 从注胶平台取出芯片,并往右上方两个注胶孔各加入9ul(核酸)或12ul(蛋白)凝胶染料混合物。(对于蛋白实验还要取12ul 去染色试剂至孔中)。

11. 往电泳芯片上数字标记的样品孔及Ladder 孔中各加入5ul Marker。(蛋白实验不需要加Marker 直接加6ul 样品或稀释的Ladder 并忽略下一步,对于RNA Pico 试剂盒还要往CS 孔中加入9ul Conditioning Solution)

12. 往Ladder 孔中加入1ul Ladder,数字标记的样品孔中各加入1ul 样品(RNA 样品和Ladder 以及蛋白样品的变性处理请参考相应试剂盒说明)。

13. 将加好样品的电泳芯片放入芯片混匀仪卡槽,注意方向以保证卡紧并用手指按压确保芯片放置平稳,旋混1 分钟,混匀完成后5 分钟之内要开始分析。

14. 打开2100 生物分析仪顶盖,放入混匀后的芯片,轻轻关上顶盖。2100 Expert 软件Instrument 操作界面上识别到已装入芯片,点击Assays 选择相应的实验类型,设定数据保存路径,点击Start 开始运行。运行中勿触碰仪器并避免台面震动。

15. 数据采集完毕用Electrode Cleaner 装纯水清洗电极。(RNA 实验前后均须用RNAse Zap 和无酶水清洗,具体操作步骤见Maintenance and Troubleshooting Guide)。

16. 打开Data 操作界面,调用数据,软件将自动运算并显示结果,点击Result Flagging 子界面设定结果颜色标记的规则,点击Print 图标生成报告。

技术资料

1. RNA QC 分析
RNA 样品的完整性在 微阵列基因表达分析技术 中是至关重要的。RNA 样品也用于构建 cDNA 库、RT-PCR 、体外翻译、核糖核酸酶(RNase) 保护检测、Northern blotting等其它应用。当样品的 RNA含量非常低时,就会面临一种特殊挑战,例如通过 显微解剖 分离出来的RNA 或者来自低丰度的诸如果蝇的 RNA。因为核糖核酸酶(RNase)是普遍存在的,所以您必须检测总 RNA 或者信使 RNA 样品的质量。芯片实验室技术可以使您更加轻松和快速地分析您的样品。只需要加入RNA 样品,启动芯片运行,然后观察实时数据显示即可。仅需要5 ng总 RNA (RNA 6000 Nano 芯片实验室试剂盒)或者200 pg总RNA(RNA 6000 Pico 芯片实验室试剂盒),系统就可以自动计算出总 RNA 样品中核糖体条带的比例,或显示信使 RNA 样品中核糖体杂质的百分含量。更重要的是,您将获得很好的浓度估计,并且可以在许多情况下(RNA Nano 芯片实验室试剂盒)不必使用 UV 测量。利用一项标记校准功能,可以获得 高度再现性数据。因为数据是数字化的,您可以将它存储到一个数据库中或者与同一个实验室或世界各地的同事共享数据。

2.基因表达定量分析
DNA 1000 芯片实验室试剂盒与特定的(RT)-PCR 试剂盒配合使用,可用于 癌症诊断学 和 癌症研究 以及其它应用领域中的指定基因的定量分析 。通过合理的设计,这些检测可以在一个很宽的动态范围内提供定量的和精确的结果。与其它的技术相比(如实时 RT-PCR),利用多重PCR方法可在每个反应中分析更多的基因,并且具有准确、方便以及其它很多 优于凝胶电泳的优势。 请参考一个 19-plex 多重 PCR 应用实例。我们的合作伙伴 QIAGEN 和 Maxim Biotech 提供专门为 多重 PCR 应用 设计的产品。

3.比较基因组杂交的DNA质量控制
比较基因组杂交(CGH)可以同时检测基因组中多个位点的基因拷贝变化,从而为肿瘤研究、发育异常或开发诊断和治疗靶点提供了一个重要的研究手段。充分利 用该项技术进行人类疾病研究需要在基因组杂交之前对DNA实行质量控制。安捷伦2100芯片生物分析系统在比较基因组杂

4. 分析蛋白质样品的更好途径
您是否从事表达重组蛋白质、纯化蛋白质,稳定性研究或者抗体研究?利用和Caliper Life Sciences, Inc共同开发的实验室芯片技术,增强型蛋白质 200 和增强型蛋白质 50 芯片实验室试剂盒为各类样品的分析提供了一种轻松快捷的途径。与安捷伦 2100 芯片生物分析仪配合使用,每个芯片能够提供10种不同蛋白质样品的大小、纯度以及浓度信息。只需要简单地加入蛋白质样品,启动芯片运行,然后观察实时数据 显示即可。不到30分钟就可以完成检测。不需要传统 SDS-PAGE技术所需的凝胶和缓冲液、冗长的染色或者成像步骤。蛋白质实验室芯片试剂盒以其小巧的包装提供实验所需的所有试剂。因为数据是数字化的, 所以您可以将它存储到一个数据库中或者与不同实验室和世界各地的同事共享。

服务协议

1.     本收费标准由纳米生化平台(隶属中国科学院苏州纳米技术与纳米仿生研究所)制定,涉及仪器类型为微电泳生物分析仪,制造商为Agilent,型号为Agilent 2100。

2.     一般情况下,本仪器不开放用户使用权限,需委托平台工作人员操作。委托使用费用由两部分构成:1)芯片费用;2)分析物上样检测费用。其中1)为可选项。

3.     芯片费用:生化平台备RNA 6000 Nano总RNA分析芯片供用户使用,详细价格见附录。用户也可自行准备芯片,但需保证芯片质量,由于芯片问题导致的实验结果不理想,平台不承担任何责任。

4.     分析物进样检测费用: 以一片芯片检测一次计费一次,单次300元。

5.     如客户委托平台购买芯片,客户需支付购买芯片的费用。

6.     对于确有需要自行操作该仪器的用户,可向仪器管理员提出申请,经批准后参加培训和考核 (费用300元/人/次)。通过后获得独立操作资质(如连续90天未使用则该资质自动失效)。用户自行使用该仪器需提前向管理员预约,并自备实验所需的芯片、试剂和耗材。自行使用费用按300元/小时计算,不足1小时的部分, 30分钟以内按150元计,超过30分钟按300元计。

7.     自行使用该仪器的用户需保证严格按规范进行操作,且使用的芯片、试剂和耗材不会对仪器造成危害。如因违反上述规定造成仪器损坏者,由操作者及其所在单位承担全部责任(包括但不限于维修、更换部件等所产生的费用)。

8.     由于仪器服务成本的变动,平台保留在未预先通知的情形下调整本收费标准内容的权力。

9.     本收费标准自发布之日起开始执行。

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