仪器介绍
美国 Luminex 公司开发的 xMAP (flex Multiplex Assay Platform) 技术,是基于编码微球和流式技术的一种临床应用型的高通量发光检测技术,又被称为“液相悬浮芯片技术”、“多功能流式点阵技术”、“液相芯片分析技术”、“流式荧光检测技术”、“多功能多指标并行分析技术”、“(微球)悬浮阵列技术”等。该项技术是继 DNA 微阵列技术、化学发光技术之后的新一代高通量分子及免疫检测技术平台,是临床诊断领域及生命科学研究中的一大热点。它有机整合了荧光编码微球技术、激光分析技术、流式细胞技术、高速数字信号处理技术、计算机数据处理等多项最新科技成果,具有自由组合、高通量、高速度、低成本、准确性高、重复性好、灵敏度高、线性范围广、无需洗涤、操作简便、在同一平台上即可完成蛋白质和核酸的检测等优点,代表着生命科学基础研究和医学诊断技术的发展方向。xMAP 技术是首个通过美国 FDA 认证的临床应用型高通量诊断技术,并被全球科技产业和行业的权威机构 Frost & Sullivan 授予 “2005 年度诊断技术革新大奖” 殊荣,是目前唯一纳入美国临床实验室质控网络的高通量诊断技术。
以目前最主要的仪器机型 Luminex 200TM 为例,平台中包含一种直径 5.6 μm 的聚苯乙烯微球,其被两种光谱特性不同的荧光染料染色。通过精确控制两种荧光染料的浓度配比(10×10),可以获得一个 100 种荧光编码的微球阵列,每种微球表面可结合一种反应物。微球表面拥有 108 个活化羧基基团,可以与蛋白抗体的氨基或核酸探针的氨基共价交联。由于微球可通过其编码荧光被识别,因而可以实现在一个混合反应体系中同时进行 100 项反应的检测,每个编码微球都对应特定的检测项目。另一种荧光物质与报告分子交联,用于测定微球表面生物反应的量。检测时,先把针对不同待测物的荧光编码微球混合,然后加入待测物质或者待测的扩增片段,所形成的复合物再与荧光标记物(藻红蛋白、Alexa 532 或 Cy3 等)发生结合反应。微球在流动鞘液的带动下单列依次通过红绿激光,红色激光 (635 nm) 用来判定微球的荧光编码,绿色激光 (532 nm) 用来测定微球上报告分子的荧光强度。由于短时间内有大量微球通过流路,因而达到快速准确的定量检测目的。
Luminex 200 经典液相芯片系统是多重检测领域内评价最高的高通量平台。应用领域包括自身免疫研究、肿瘤研究、心血管疾病研究、糖尿病与代谢病研究、信号通路研究、基因突变研究、HLA 配型研究、HPV 分型研究等众多领域。Luminex 200实现了多达100重生物标志物检测能力,为高通量研究提供检测平台。Luminex 200系统是由激光系统、光学系统、液流系统、液流控制系统以及先进的数字处理系统和高通量XY平台组成,提供一整套先进的、完整的液相芯片检测平台。Luminex 200结合了磁珠/非磁珠多重反应体系、分析软件、技术支持,提供一个完整的快速、精确的生物标记定量平台。
性能指标
激光器(两根):报告激光 (532 nm), 分类激光 (635nm), 14位A/D
分辨率:带有温度补偿的光电二极管,12位A/D分辨率
检测通道能力:具有多通路检测能力,100种指标/样品
液流速度:90 μl/s
读板时间:35-60 min/96孔
信号处理模式:线性,可选对数或线性显示
信号测量分辨率:15位有效
具有振板功能,振板时间可调(可编程秒/分钟,0~60min),振板速度可调(低、中、高)
仪器配置
Luminex® 200 xPONENT System 配置包括:
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液相悬浮芯片仪主机
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XYP平板输送系统
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SD 鞘液传输系统
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自动效验校准板 (AMP)
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鞘液桶和废液桶
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xPONENT控制与分析软件